Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒
Product classification
Relevant Articles
儲存條件 | -20℃,避光,有效期1年 |
規(guī)格 | 500T |
單位 | 盒 |
產(chǎn)品說明:
Calcein-AM 是一種對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,發(fā)綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的 Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團(tuán),增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子 Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑(如 BCECF-AM 和 CFDA)相比,由于 Calcein, AM 細(xì)胞毒性極低,是適合用于活細(xì)胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細(xì)胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein-AM 僅用于對活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM 常常與死細(xì)胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細(xì)胞的細(xì)胞膜,僅能穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的 DNA 雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI 僅對死細(xì)胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。而用 545 nm 激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。
本試劑盒的工作原理就在于 Calcein-AM 和 PI 的雙重染料,來進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色標(biāo)記,從而進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實驗體系,單次就 200µl 細(xì)胞懸液進(jìn)行染色,可以做 500 次檢測