12800017 DMEM高糖粉末培養(yǎng)基 （含丙酮酸鈉）

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12800017 DMEM高糖粉末培養(yǎng)基 （含丙酮酸鈉）詳細說明：

DMEM高糖培養(yǎng)基 （含L谷氨酰胺，含丙酮酸鈉），原代細胞|細胞系|細胞株|菌種；細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和優(yōu)培養(yǎng)條件！
DMEM高糖培養(yǎng)基 （含L谷氨酰胺，含丙酮酸鈉）培養(yǎng)條件：
*培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%
DMEM高糖培養(yǎng)基 （含L谷氨酰胺，含丙酮酸鈉）制備:
1. 分離和培養(yǎng)宿主細胞；
2. 通過病毒介導或者其它的方式將多能性相關的基因導入宿主細胞；
3. 將病毒感染后的細胞種植于飼養(yǎng)層細胞上，并在ES細胞培養(yǎng)體系中培養(yǎng)，同時在培養(yǎng)期間根據(jù)需要加入相應的小分子物質以促其重編程；
4. 出現(xiàn)ES樣克隆后進行IPS細胞的鑒定（細胞形態(tài)、特定基因的表達、表觀遺傳修飾、體外分化潛能等方面）。
細胞生長：貼壁生長
細胞形態(tài)：上皮樣；多角形
細胞傳代：1:2-1:4傳代；每周2-3次
DMEM高糖培養(yǎng)基 （含L谷氨酰胺，含丙酮酸鈉）傳代方法：
收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
一．如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。
二．如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次
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